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酶标仪的测定波长范围有单波长和双波长之分
加入时间：2012-07-26 08:53:52 当前新闻点击率：5100
酶标仪的测定法激发光谱使用范围有单激发光谱和双激发光谱之分，基本网站内容给出：
一般酶标仪的医疗器械测定波长在400～750nm或800nm之间，完全可以满足ELISA的显色测定。目前国内常见的ELISA试剂盒所使用的标记用酶均为辣根过氧化物酶(HRP)，底物通常为四甲基联苯胺(TMB)和邻苯二胺(OPD)，其在过氧化氢溶液的存在下，经HRP作用，分别氧化为2，2，—二氨基偶氮苯(DAB)和联苯醌。当pH值为5．0左右时，DAB在450nm波长处有最大吸收，当pH值降为L 0时，最大吸收波长移至492 nm，同时摩尔消光系数变大，显色加深，因而常用强酸如硫酸或盐酸终止反应。TMB的氧化产物联苯醌在波长450nm处有最大消光系数，如果HRP量少，H：O：和TMB过量时，则形成蓝色的阳离子根。降低pH，即可使蓝色的阳离子根转变为黄色的联苯醌，使用硫酸作为终止剂可使产物稳定90min。
因此，450nm和492 nm两个波长是目前ELISA测定最常用的。各种医疗设备酶标仪都配有放置滤光片的可自动转换的部件，可以同时安装6～8片滤光片，所配备的滤光片均应包括上述两个波长，有的酶标仪以490nm滤光片替代492nm滤光片，影响不大。除了这两个基本滤光片外，考虑到双波长比色的需要，还应有620nm或630nm或650nm和405nm波长的滤光片，其他滤光片可根据自己的需要选择。有时，有的实验室希望用酶标仪作微量生化测定，故酶标仪生产厂家对其生产的酶标仪扩展了紫外检测功能，此时需要一个340 nm波长滤光片。此时，酶标仪的测定波长范围就成为340—750nm或800nm。
酶标仪的治疗设施有单吸光度和双吸光度查重功能模块。时常用到者与忽略在什么样情况下下用到单或双吸光度查重。常说的“单吸光度”那就是用到本身对显色具比较大获取的吸光度即450 nm或492 nm确定比色测量；而“双吸光度”则除了有用对显色具比较大获取的吸光度即450 nm或492 nm确定比色测量外，一并用对特异显色不敏感性的吸光度如630 nm确定测量，酶标仪后来复印来的吸光度则为任何事物之差。630 nm吸光度下得了到的吸光度是非曲直特异的，出自于板孔上譬如指印、积尘、脏物等导致的的获取。于是，在ELISA比色测量中，合适用到双吸光度，且不用说设空白图片孔。 上一篇:
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